293XL-hTLR9細胞，人胚腎細胞

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產品名稱：293XL-hTLR9細胞

中文名稱：293XL-hTLR9細胞為穩定表達人TLR9基因的人胚腎細胞，來源于人胚腎

細胞形態：上皮樣

生長狀態：貼壁生長

培養基：DMEM 高糖90%, Fetal Bovine Serum 10%，Blasticidin 10μg/ml

培養條件：37℃ 5% CO2

消化條件：不可以使用胰酶進行消化。去培養基，加入2ml新鮮培養基后，反復吹打，使細胞分散成單個細胞，重新接種。

傳化比例：1：5-1：10

換液時間：2-3天換液一次

凍存液比例：85%培養基，10%FBS, 5% (v/v) DMSO

凍存密度：3-5 ×10^6/管，液氮保存

293XL-hTLR9細胞，人胚腎細胞操作常見問題１：

培養液pH對細胞生長的影響有哪些？

由于大多數細胞適宜pH為7.2~7.4，偏離此范圍對細胞將產生不良的影響。各種細胞對pH的要求也不*相同，原代培養細胞一般對pH變動耐受差，無限細胞系耐受力強。

但總體來說，細胞耐酸性比耐堿性強一些，偏酸環境中更利于細胞生長。因此，我們在配制培養用液時，可把液體的pH稍微調得偏酸一些。培養基在經過0.10um或0.22um濾膜過濾時，溶液的pH還會向上浮動0.2左右。

293XL-hTLR9細胞，人胚腎細胞操作常見問題２：

細胞傳代消化時所用胰酶濃度越高越好嗎？

不見得！因為胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、溫度、胰酶濃度及溶液中是否含有Ca++, Mg++離子和血清等因素有關。通常情況下，pH 8.0 , 溫度 37 oC 其作用能力zui強。另外，鈣、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。

培養細胞每次進行傳代消化前，一定要用D-Hanks液或PBS液反復沖洗細胞培養瓶，以便于將含血清的培養基沖洗干凈，這樣就能大大提高消化液的消化能力。

細胞中心通常使用的消化液濃度為：

（1）０.０５％胰蛋白酶＋０.０２％ＥＤＴＡ；

（2）０.２５％胰蛋白酶＋０.０３％ＥＤＴＡ。

（3）0.25% 胰蛋白酶

    溶液ｐＨ８.０～９.０；使用Ｄ－Ｈａｎｋ液配制。

多數細胞傳代消化可使用０.０５％胰蛋白酶＋０.０２％ＥＤＴＡ這種消化液。

293XL-hTLR9細胞，人胚腎細胞操作常見問題３：

培養細胞狀態欠佳原因有哪些：

1、  培養基的新鮮程度：一般加入血清后的*培養基，2周內用完。否則血清有效成分失活，影響細胞培養。

         建議：*培養基一次不要配太多，200ml以下?；蚋鶕昧繘Q定。

 2、  細胞外源微生物的污染：細胞不宜長期體外培養，因為外源微生物污染的幾率大大提高。易發現和難發現的。影響細胞狀態。

        建議：實驗前凍存一批細胞，隔幾個月重新復蘇。即保證實驗所用細胞代數*，又將外源污染的后果降到zui低。

3、  排除其他原因：如更換培養條件（血清、培養基等）；使用器皿的潔凈程度；

HY0001  K562細胞，人慢性髓原白血病細胞株    1640  10%   懸浮    美國

HY0002  H128細胞，人小細胞肺癌細胞株    DMEM 10%    懸浮,集聚   美國

HY0003  H69細胞，人小細胞肺癌細胞株 DMEM 10%    懸浮    美國

HY0004  HS77細胞，人小細胞肺癌細胞株    DMEM 10%    懸浮    美國

HY0005  A549細胞，人肺腺癌細胞株    1640  10%   上皮樣  美國

HY0006  LTEP-A2細胞，人肺腺癌細胞株 1640  10%   上皮樣  中國

HY0007  SPC-A1細胞，人肺腺癌細胞株  1640  10%   上皮樣  中國

HY0008  D6細胞，人肺腺癌細胞株  1640  10%   上皮樣  美國

HY0009  LAX細胞，人肺腺癌細胞株 1640  10%   皮樣    中國

HY0010  NCI-H460細胞，人大細胞肺癌細胞株    DMEM 10%    上皮樣  中國

HY0011  95-D細胞，人高轉移肺癌細胞株    1640  10%      

HY0012  Calu-3細胞，人肺腺癌細胞株  DMEM 10%       

HY0013  HCCLMS細胞，人肝轉移癌細胞株    DMEM 10%    上皮樣  中國

HY0014  SMMC-772細胞，人肝癌細胞株  DMEM 10%    上皮樣  中國

HY0015  BEL-7402細胞，人肝癌細胞株  DMEM 10%    上皮樣  中國

HY0016  BEL-7404細胞，人肝癌細胞株  DMEM 10%        中國

HY0017  BEL-7405細胞，人肝癌細胞株  DMEM 10%        中國

HY0018  QGY-7701細胞，人肝癌細胞株  DMEM 10%        中國

HY0019  QGY-7703細胞，人肝癌細胞株  DMEM 10%        中國

HY0020  QGY-Q3細胞，人肝癌細胞株    DMEM 10%    上皮樣  中國

HY0021  HepG2細胞，人肝癌細胞株 DMEM 10%        中國

HY0022  Hep3B細胞，人肝癌細胞株 DMEM 10%        中國

HY0023  BGC-823細胞，人低分化胃腺癌細胞株   DMEM 10%        中國

HY0024  SGC-7901細胞，人胃癌細胞株  1640  10%   上皮樣  中國

HY0025  ECA-109細胞，人食管癌細胞株 DMEM 10%       

HY0026  MNK-7細胞，人乳癌細胞株 1640  10%   上皮樣  美國

HY0027  SK-BR-3細胞，人乳腺腺癌細胞株   1640  10%   上皮樣 

HY0028  BT-474細胞，人乳癌細胞株    DMEM 10% insulin（0.2U/ml） 上皮樣,呈片狀

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